摘要:目的验证猪源脱细胞结膜基质中病毒灭活工艺的灭活效果。方法用不同浓度次氯酸钠溶液对猪睾丸(ST)细胞和牛肾(MDBK)细胞行细胞毒性实验;选择猪眼结膜、脱细胞结膜基质各3 个批号,用ST 细胞和MDBK 细胞进行次氯酸钠灭活处理和钴-60(25 kGy)辐照处理后的样品/终止产物的细胞毒性实验;以猪细小病毒(PPV)和牛病毒性腹泻病毒(BVDV)为指示病毒,采用细胞病变法分别测定次氯酸钠工艺和钴-60(25 kGy)辐照工艺对猪脱细胞结膜基质(中间品)病毒灭活效果,并进行细胞盲传实验。结果次氯酸钠溶液稀释至质量浓度100.00 mg/L(1.0 ‰)时,ST 细胞增殖率大于70 %;质量浓度50.00 mg/L(0.5 ‰)次氯酸钠溶液的MDBK 细胞增殖率大于70 %。1.0 ‰次氯酸钠溶液处理的猪眼结膜样品在10 倍体积稀释后,对ST 细胞和MDBK 细胞均无抑制作用。脱细胞结膜基质辐照处理,经100 倍体积稀释后对MDBK 细胞无毒性, 经10 倍体积稀释后对ST 细胞无毒性影响。3 个批号猪眼结膜样品经过次氯酸钠溶液处理30 min后,PPV 和BVDV 的灭活平均降低系数分别为≥ 4.542 logs 和≥ 4.333 logs;负载PPV 病毒样品的盲传3 代为阳性,即仍能检测到PPV。3 个批号脱细胞结膜基质样品经钴-60 辐照后,PPV 和BVDV 的灭活平均降低系数分别为≥ 4.792 logs≥ 3.667 logs, 负载BVDV 的3 个批号样品盲传结果为阴性, 负载PPV 病毒的3 个批号样品盲传结果为阳性。结论用次氯酸钠溶液和钴-60 辐照两个工艺分别处理脱细胞结膜基质(中间品)后的病毒灭活降低系数累加为:BVDV 总降低系数大于8 logs,PPV 总降低系数大于9 logs。两个工艺联合可以有效灭活猪源脱细胞结膜基质中污染的PPV 和BVDV。