曲妥珠单抗是唯一被批准用于人表皮生长因子受体2 (HER2)阳性的晚期胃癌(GC)一线治疗的靶向药物，但其高的初耐药率和迅速出现的二次耐药限制了其临床效益。我们发现，曲妥珠单抗耐药(TR)的GC细胞表现出较高的糖酵解活性，这是由己糖激酶2 (HK2)依赖的糖酵解以昼夜节律模式控制的(在授时因子时间6时更高，在授时因子时间18时更低)。机制上，HK2昼夜节律振荡是由一个由过氧化物酶体增殖物激活受体γ (PPARγ)和核心时钟基因PER1组成的转录复合物调控的。体内和体外实验表明，沉默PER1可以扰乱PER1- hk2的昼夜节律，逆转曲妥珠单抗耐药。此外，二甲双胍抑制糖酵解和PER1，在zeitgeber时间6联合曲妥珠单抗显著改善了曲妥珠单抗在GC中的疗效。总的来说，这些数据将昼夜节律时钟引入到曲妥珠单抗治疗中，并提出了一种潜在有效的时间疗法策略，以逆转GC中的曲妥珠单抗耐药。