拉曼光谱由于近几年来以下几项技术的集中发展而有了更广泛的应用。这些技术是：CCD检测系统在近红外区域的高灵敏性，体积小而功率大的二极管激光器，与激发激光及信号过滤整合的光纤探头。这些产品连同高口径短焦距的分光光度计，提供了低荧光本底而高质量的拉曼光谱以及体积小、容易使用的拉曼光谱仪。
拉曼光谱的含义
光照射到物质上发生弹性散射和非弹性散射。弹性散射的散射光是与激发光波长相同的成分。非弹性散射的散射光有比激发光波长长的和短的成分， 统称为拉曼效应。
当用波长比试样粒径小得多的单色光照射气体、液体或透明试样时，大部分的光会按原来的方向透射，而一小部分则按不同的角度散射开来，产生散射光。在垂直方向观察时，除了与原入射光有相同频率的瑞利散射外，还有一系列对称分布着若干条很弱的与入射光频率发生位移的拉曼谱线，这种现象称为拉曼效应。由于拉曼谱线的数目，位移的大小，谱线的长度直接与试样分子振动或转动能级有关。因此，与红外吸收光谱类似，对拉曼光谱的研究，也可以得到有关分子振动或转动的信息。目前拉曼光谱分析技术已广泛应用于物质的鉴定，分子结构的研究谱线特征。
拉曼散射光谱的特征
a.拉曼散射谱线的波数虽然随入射光的波数而不同，但对同一样品，同一拉曼谱线的位移与入射光的波长无关，只和样品的振动转动能级有关；
b. 在以波数为变量的拉曼光谱图上，斯托克斯线和反斯托克斯线对称地分布在瑞利散射线两侧， 这是由于在上述两种情况下分别相应于得到或失去了一个振动量子的能量。
c. 一般情况下，斯托克斯线比反斯托克斯线的强度大。这是由于Boltzmann分布，处于振动基态上的粒子数远大于处于振动激发态上的粒子数。
拉曼光谱技术的优越性
提供快速、简单、可重复、且更重要的是无损伤的定性定量分析，它无需样品准备，样品可直接通过光纤探头或者通过玻璃、石英、和光纤测量。此外：
1 由于水的拉曼散射很微弱，拉曼光谱是研究水溶液中的生物样品和化学化合物的理想工具。
2 拉曼一次可以同时覆盖50-4000波数的区间，可对有机物及无机物进行分析。相反，若让红外光谱覆盖相同的区间则必须改变光栅、光束分离器、滤波器和检测器。
3 拉曼光谱谱峰清晰尖锐，更适合定量研究、数据库搜索、以及运用差异分析进行定性研究。在化学结构分析中，独立的拉曼区间的强度可以和功能集团的数量相关。
4 因为激光束的直径在它的聚焦部位通常只有0.2-2毫米，常规拉曼光谱只需要少量的样品就可以得到。这是拉曼光谱相对常规红外光谱一个很大的优势。而且，拉曼显微镜物镜可将激光束进一步聚焦至20微米甚至更小，可分析更小面积的样品。
5 共振拉曼效应可以用来有选择性地增强大生物分子特个发色基团的振动，这些发色基团的拉曼光强能被选择性地增强1000到10000倍。
拉曼光谱分析技术分类
1、单道检测的拉曼光谱分析技术
2、以CCD为代表的多通道探测器用于拉曼光谱的检测仪的分析技术
3、采用傅立叶变换技术的FT-Raman光谱分析技术
4、共振拉曼光谱分析技术
5、表面增强拉曼效应分析技术
与分子极化率的关系
1、拉曼频移：散射光频与激发光频之差，取决于分子振动能级的改变，所以它是特征的，与入射光的波长无关，适应于分子结构的分析
2、拉曼光谱与分子极化率的关系分子在静电场E中，极化感应偶极矩P为静电场E与极化率的乘积诱导偶极矩与外电场的强度之比为分子的极化率分子中两原子距离最大时，极化率也最大拉曼散射强度与极化率成正比例应用激光光源的拉曼光谱法应用激光具有单色性好、方向性强、亮度高、相干性好等特性，与表面增强拉曼效应相结合，便产生了表面增强拉曼光谱。其灵敏度比常规拉曼光谱可提高104~107倍，加之活性载体表面选择吸附分子对荧光发射的抑制，使分析的信噪比大大提高。已应用于生物、药物及环境分析中痕量物质的检测。
共振拉曼光谱是建立在共振拉曼效应基础上的另一种激光拉曼光谱法。共振拉曼效应产生于激发光频率与待测分子的某个电子吸收峰接近或重合时，这一分子的某个或几个特征拉曼谱带强度可达到正常拉曼谱带的104~106倍，有利于低浓度和微量样品的检测。已用于无机、有机、生物大分子、离子乃至活体组成的测定和研究。激光拉曼光谱与傅里叶变换红外光谱相配合，已成为分子结构研究的主要手段。
共振拉曼光谱的优缺点
1、共振拉曼光谱的优点：
（1）基频的强度可以达到瑞利线的强度。
（2）泛频和合频的强度有时大于或等于基频的强度。
（3）通过改变激发频率，使之仅与样品中某一物质发生共振，从而选择性的研究某一物质。
（4）和普通拉曼相比，其散射时间短，一般为10-12~10-5S。
2、共振拉曼光谱的缺点：
需要连续可调的激光器，以满足不同样品在不同区域的吸收。
电化学原位拉曼光谱法电化学原位拉曼光谱法， 是利用物质分子对入射光所产生的频率发生较大变化的散射现象， 将单色入射光（包括圆偏振光和线偏振光）激发受电极电位调制的电极表面， 通过测定散射回来的拉曼光谱信号（频率、强度和偏振性能的变化）与电极电位或电流强度等的变化关系。一般物质分子的拉曼光谱很微弱， 为了获得增强的信号， 可采用电极表面粗化的办法， 可以得到强度高104-107倍的表面增强拉曼散射（SurfaceEnahanced Raman Scattering, SERS） 光谱， 当具有共振拉曼效应的分子吸附在粗化的电极表面时， 得到的是表面增强共振拉曼散射（SERRS）光谱， 其强度又能增强102-103。
电化学原位拉曼光谱法的测量装置主要包括拉曼光谱仪和原位电化学拉曼池两个部分。拉曼光谱仪由激光源、收集系统、分光系统和检测系统构成， 光源一般采用能量集中、功率密度高的激光， 收集系统由透镜组构成， 分光系统采用光栅或陷波滤光片结合光栅以滤除瑞利散射和杂散光以及分光检测系统采用光电倍增管检测器、半导体阵检测器或多通道的电荷藕合器件。原位电化学拉曼池一般具有工作电极、辅助电极和参比电极以及通气装置。为了避免腐蚀性溶液和气体侵蚀仪器， 拉曼池必须配备光学窗口的密封体系。在实验条件允许的情况下， 为了尽量避免溶液信号的干扰， 应采用薄层溶液（电极与窗口间距为0.1～1mm） , 这对于显微拉曼系统很重要， 光学窗片或溶液层太厚会导致显微系统的光路改变， 使表面拉曼信号的收集效率降低。电极表面粗化的最常用方法是电化学氧化- 还原循环（Oxidation-Reduction Cycle,ORC）法， 一般可进行原位或非原位ORC处理。
目前采用电化学原位拉曼光谱法测定的研究进展主要有：
1）通过表面增强处理把测检体系拓宽到过渡金属和半导体电极。虽然电化学原位拉曼光谱是现场检测较灵敏的方法， 但仅能有银、铜、金三种电极在可见光区能给出较强的SERS。许多学者试图在具有重要应用背景的过渡金属电极和半导体电极上实现表面增强拉曼散射。
2）通过分析研究电极表面吸附物种的结构、取向及对象的SERS 光谱与电化学参数的关系，对电化学吸附现象作分子水平上的描述。
3）通过改变调制电位的频率， 可以得到在两个电位下变化的“时间分辨谱”， 以分析体系的SERS 谱峰与电位的关系， 解决了由于电极表面的SERS 活性位随电位而变化而带来的问题。
拉曼信号的选择入射激光的功率，样品池厚度和光学系统的参数也对拉曼信号强度有很大的影响，故多选用能产生较强拉曼信号并且其拉曼峰不与待测拉曼峰重叠的基质或外加物质的分子作内标加以校正。其内标的选择原则和定量分析方法与其他光谱分析方法基本相同。
斯托克斯线能量减少，波长变长反斯托克斯线能量增加，波长变短拉曼光谱的应用方向拉曼光谱分析技术是以拉曼效应为基础建立起来的分子结构表征技术，其信号来源与分子的振动和转动。拉曼光谱的分析方向有：
定性分析：不同的物质具有不同的特征光谱，因此可以通过光谱进行定性分析。
结构分析：对光谱谱带的分析，又是进行物质结构分析的基础。
定量分析：根据物质对光谱的吸光度的特点，可以对物质的量有很好的分析能力。
拉曼光谱用于分析的优缺点
1、拉曼光谱用于分析的优点拉曼光谱的分析方法不需要对样品进行前处理，也没有样品的制备过程，避免了一些误差的产生，并且在分析过程中操作简便，测定时间短，灵敏度高等优点
2、拉曼光谱用于分析的缺点
（1）拉曼散射面积
（2）不同振动峰重叠和拉曼散射强度容易受光学系统参数等因素的影响
（3）荧光现象对傅立叶变换拉曼光谱分析的干扰
（4）在进行傅立叶变换光谱分析时，常出现曲线的非线性的问题
（5）任何一物质的引入都会对被测体体系带来某种程度的污染，这等于引入了一些误差的可能性，会对分析的结果产生一定的影响
仪器型号
赛默飞 Dxr 2Xi、HORIBA Scientific、雷尼绍RM2000、Renishaw-invia拉曼光谱仪
主要规格及技术指标
1. 激光光源：325/455/514/532/633/785激光；
2. 光谱分辨率：1cm-1 ；
3. 光谱范围：50~4000cm-1 ；
4. 空间分辨率：1 μm；
5. 共焦采样深度：1.5 ~2 μm；
材料要求
1. 粉体样品10mg以上；
2. 块体样品尺寸建议不要太大；
3. 液体提供1ml以上；
主要功能及应用范围
1. 可检测物质分子振动光谱和微观结构，与红外吸收光谱互为补充；
2. 未知物质的无损鉴定，广泛应用于材料、地质、化学、物理、生物等众多领域；